Получение дендритных клеток мышей in vitro с помощью Flt3-L и их характеристика

V. P. Tereshchenko, A. S. Bulygin, R. Yu Zavodskii, E. V. Kulikova, S. V. Sennikov

Результат исследования: Научные публикации в периодических изданияхстатьярецензирование

Аннотация

Введение. В настоящее время для модуляции адаптивного иммунного ответа с целью коррекции тех или иных заболеваний человека активно разрабатываются клеточные вакцины на основе миелоидных дендритных клеток (мДК). Однако об эффективности применения плазмацитоидных дендритных клеток (пДК) в тех же целях все еще мало данных. Цель исследования - разработка протокола получения пДК мышей с помощью рекомбинантного Flt3-L in vitro и описание фенотипических и функциональных свойств полученных дендритных клеток (ДК) для решения вопроса о возможности их использования при создании клеточных вакцин. Материал и методы. ДК получали путем культивирования клеток костного мозга мышей в присутствии Flt3-L. Относительное количество и фенотип ДК оценивали с помощью проточной цитофлуориметрии, а морфологию ДК - с помощью флуоресцентной микроскопии. Функциональные свойства ДК изучали по их способности индуцировать Трег-клетки и пролиферацию СD4+-лимфоцитов в смешанной культуре лимфоцитов. Экспрессию рецептора хемотаксиса CCR9 на ДК оценивали с помощью проточной цитофлуориметрии. Результаты. Показано, что c помощью Flt3-L из клеток костного мозга мышей возможно in vitro получение культур ДК с относительно высоким содержанием B220+CD11c+-пДК и Sirpa+CD11c+-мДК. B220+CD11c+-пДК и Sirpa+CD11c+-мДК в полученных культурах отличались морфологией и степенью зрелости. В смешанной культуре лимфоцитов полученные in vitro ДК, обладали свойствами незрелых ДК, что проявлялось в их способности генерировать повышенное количество Трег и вызывать сниженную пролиферацию CD4+-лимфоцитов. При стимуляции полученных ДК с помощью CpG ДНК наблюдалось их созревание, и снижение способности к индукции Трег и увеличение способности к индукции пролиферации CD4+-лимфоцитов, т. е. приобретение иммуногенной функции. Относительно небольшое количество В220+CD11с+-пДК и Sirpa+CD11c+-мДК несли на поверхности рецептор хемотаксиса CCR9, однако количество В220+CD11с+-пДК и Sirpa+CD11c+-мДК, несущих CCR9 внутриклеточно, стремилось к 100 %. Заключение. Таким образом, с помощью Flt3-L из клеток костного мозга мышей возможно in vitro получение культур В220+CD11с+-пДК и Sirpa+CD11c+-мДК, пригодных к применению при разработке клеточных вакцин для подавления нежелательного адаптивного иммунного ответа и для индукции желательного.
Переведенное названиеGeneration of murine dendritic cells in vitro using Flt3-L and their characteristics
Язык оригиналарусский
Страницы (с-по)215-226
Число страниц12
ЖурналImmunologiya
Том41
Номер выпуска3
DOI
СостояниеОпубликовано - 2020

Ключевые слова

  • Ccr9
  • Flt3-l
  • Myeloid dendritic cells
  • Plasmacytoid dendritic cells

ГРНТИ

  • 34 БИОЛОГИЯ

Fingerprint Подробные сведения о темах исследования «Получение дендритных клеток мышей in vitro с помощью Flt3-L и их характеристика». Вместе они формируют уникальный семантический отпечаток (fingerprint).

Цитировать