Search for breast cancer proteomic markers in total blood exosomes

Переведенное название: Поиск протеомных маркеров рака молочной железы в составе суммарных экзосом крови

O. S. Tutanov, Y. S. Bakakina, K. V. Proskura, A. E. Grigoryeva, V. E. Syakhovich, S. A. Beliaev, E. I. Ryabchikova, Y. P. Tsentalovich, P. P. Laktionov, S. N. Tamkovich

Результат исследования: Научные публикации в периодических изданияхстатья

Аннотация

Актуальность. Актуальной задачей повышения эффективности ранней диагностики онкологических заболеваний является поиск высокоспецифичных опухолевых маркеров в биологических жидкостях организма. Значительная часть экзосом ассоциирована с поверхностью форменных элементов крови, однако белковый спектр таких экзосом ранее не исследовался. Использование суммарных экзосом крови (экзосом плазмы и экзосом, ассоциированных с поверхностью клеток крови) может не только значительно повысить специфичность и чувствительность существующих методов, но и выявить новые онкомаркеры для жидкостной биопсии. Цель работы - поиск кандидатных белковых онкомаркеров рака молочной железы (РМЖ) путем сравнения 2D-протеомных карт суммарных экзосом крови здоровых женщин и больных РМЖ. Материал и методы. Экзосомы выделены из крови здоровых женщин и больных РМЖ методом ультрафильтрации с последующим ультрацентрифугированием и охарактеризованы при помощи трансмиссионной электронной микроскопии и иммуноцитохимии. Концентрацию белка в экзосомах определяли при помощи коммерческого набора NanoOrange Protein Quantitation kit (Invitrogen). Протеом экзосом исследован с помощью 2D-электрофореза с последующей идентификацией белков методом масс-спектрометрии. Результаты. Получены высокоочищенные препараты микровезикул суммарной крови размером не более 100 нм, на поверхности которых иммуноцитохимически были выявлены специфические для экзосом маркеры (CD63, CD9 и CD24). Сравнительный анализ протеомных карт экзосомальных белков здоровых женщин и больных РМЖ, полученных с помощью 2D-электрофореза, позволил установить значимые различия в уровне экспрессии и наборе белков в норме и патологии. Методом пептидного фингерпринта идентифицировано 11 перспективных протеомных маркеров РМЖ, из них LRG и у-цепь FGB выявлены в составе экзосом впервые (согласно базе Exocarta). Методом MALDI-TOF масс-спектрометрии идентифицировано 99 белков в препаратах экзосом крови здоровых женщин и больных РМЖ, из них 35 % выявлены в составе экзосом впервые (согласно базе Exocarta). В составе суммарных экзосом крови онкологических больных выявлено 17 (53 %) белков, ассоциированных с РМЖ. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что суммарные экзосомы крови являются перспективным источником диагностического материала для поиска протеомных маркеров РМЖ. Идентифицированные протеомные онкомаркеры в их составе требуют дальнейшей валидации
Переведенное названиеПоиск протеомных маркеров рака молочной железы в составе суммарных экзосом крови
Язык оригиналаанглийский
Страницы (с-по)49-61
Число страниц13
ЖурналSiberian Journal of Oncology
Том19
Номер выпуска2
DOI
СостояниеОпубликовано - 1 фев 2020

Ключевые слова

  • Breast cancer
  • Exosomes
  • Mass-spectrometry
  • Proteomic markers
  • Transmission electron microscopy

ГРНТИ

  • 34 БИОЛОГИЯ

Fingerprint Подробные сведения о темах исследования «Поиск протеомных маркеров рака молочной железы в составе суммарных экзосом крови». Вместе они формируют уникальный семантический отпечаток (fingerprint).

  • Цитировать

    Tutanov, O. S., Bakakina, Y. S., Proskura, K. V., Grigoryeva, A. E., Syakhovich, V. E., Beliaev, S. A., Ryabchikova, E. I., Tsentalovich, Y. P., Laktionov, P. P., & Tamkovich, S. N. (2020). Search for breast cancer proteomic markers in total blood exosomes. Siberian Journal of Oncology, 19(2), 49-61. https://doi.org/10.21294/1814-4861-2020-19-2-49-61