Shp-2 gene knockout upregulates CAR-driven cytotoxicity of YT NK cells

Переведенное название: Нокаут гена shp-2 приводит к повышению CAR-опосредованной цитотоксичности NK-клеток линии YT

V. G. Subrakova, S. V. Kulemzin, T. N. Belovezhets, A. N. Chikaev, N. A. Chikaev, O. A. Koval, A. A. Gorchakov, A. V. Taranin

Результат исследования: Научные публикации в периодических изданияхстатья

Аннотация

Одна из самых распространенных причин смертей пациентов в России, наряду с болезнями системы кровообращения, - это онкологические заболевания. Перспективным средством в борьбе с раковыми клетками представляются NK-клетки (естественные киллеры), однако для успешного применения в терапии онкологических заболеваний необходимо обеспечить их накопление в опухолевых очагах, устойчивость к иммуносупрессивному микроокружению, а также более высокую цитотоксическую активность. Известно, что NK-лимфоциты уничтожают раковые клетки, экспрессирующие специфические стресс-лиганды; при этом баланс сигналов от ингибирующих и активирующих рецепторов на поверхности NK-клетки определяет, будет ли запущена цитотоксическая реакция. Один из теоретически возможных способов повышения цитотоксичности состоит в том, чтобы при помощи генетического редактирования усилить активационные сигнальные каскады в NK-клетках и/или ослабить ингибирующие, таким образом сместив баланс сигналов в сторону активации лимфоцитов и лизиса мишеней. NK-клетки с таким модифицированным цитотоксическим потенциалом могут эффективнее уничтожать раковые мишени, обладающие так называемой устойчивостью к лизису. В этой работе мы предлагаем дважды модифицировать NK-клетки. Во-первых, при помощи системы CRISPR/Cas9 проводить нокаутирование гена shp-2 (PTPN11), кодирующего белок Shp-2 - негативный регулятор активации NK-клеток; во-вторых, при помощи лентивирусных векторов интегрировать кассету, кодирующую CAR (химерный антигенный рецептор), способный специфично связываться с антигенами на поверхности раковой мишени и генерировать активирующий сигнал. В качестве модельной NK-клеточной линии нами была выбрана перевиваемая линия NK-подобного фенотипа YT, поскольку эти клетки не нуждаются в специфических цитокинах для культивирования и могут проявлять перфорин/гранзим-опосредованную цитотоксическую активность. Мы показали, что сочетание нокаута гена shp-2 и экспрессии CAR повышает цитотоксичность эффекторных клеток на модели NK-устойчивой клеточной линии аденокарциномы простаты человека Du-145, экспрессирующей специфично узнаваемый CAR антиген, белок PSMA. Подобные линии с «усиленным» цитотоксическим фенотипом в перспективе могут быть использованы для нужд противораковой терапии
Переведенное названиеНокаут гена shp-2 приводит к повышению CAR-опосредованной цитотоксичности NK-клеток линии YT
Язык оригиналаанглийский
Страницы (с-по)80-86
Число страниц7
ЖурналVavilovskii Zhurnal Genetiki i Selektsii
Том24
Номер выпуска1
DOI
СостояниеОпубликовано - 1 янв 2020

Fingerprint Подробные сведения о темах исследования «Нокаут гена shp-2 приводит к повышению CAR-опосредованной цитотоксичности NK-клеток линии YT». Вместе они формируют уникальный семантический отпечаток (fingerprint).

  • Цитировать