Изучение влияния детерминант митохондриального импорта в структуре нРНК на активность комплекса нРНК/SpCas9 in vitro

E. G. Zakirova, Y. V. Vyatkin, N. A. Verechshagina, V. V. Muzyka, I. O. Mazunin, K. E. Orishchenko

    Результат исследования: Научные публикации в периодических изданияхстатьярецензирование

    Аннотация

    О том, что нарушения структуры митохондриального генома приводят к широкому спектру нейромышечных и нейродегенеративных заболеваний, известно уже давно, но до сих пор не найдено эффективного метода лечения болезней митохондриального происхождения. В основном проблемы с терапией подобных заболеваний обусловлены состоянием гетероплазмии митохондриальной ДНК (мтДНК). Ввиду многокопийности митохондриального генома мутантные копии мтДНК часто сосуществуют с молекулами дикого типа в одной органелле. Клинические симптомы митохондриальных заболеваний и степень их манифестации напрямую зависят от количества мутантных молекул мтДНК в клетке. Смещая уровень гетероплазмии в сторону молекул дикого типа мтДНК, возможно добиться снижения негативного влияния мутации. Для этой цели разработано несколько генно-терапевтических подходов на основе TALE-нуклеаз и нуклеаз типа «цинковые пальцы», однако конструирование белковых доменов таких систем является долгим и трудоемким процессом. Cистема CRISPR/Cas9 принципиально отличается от данных систем простотой использования, высокой эффективностью и механизмом действия. Все присущие характеристики и возможности системы делают ее перспективным инструментом в области генетической инженерии митохондрий. В настоящей статье мы впервые демонстрируем, что модификации направляющей РНК за счет вcтройки последовательностей, способствующих импорту нРНК в митохондрии, не влияют на функциональную активность комплекса нРНК/SpCas9 в условиях in vitro . Полученные результаты указывают на возможность модификации системы с сохранением ее функциональности и использования в перспективе для редактирования митохондриального генома
    Переведенное названиеStudy of the effect of the introduction of mitochondrial import determinants into the gRNA structure on the activity of the gRNA/SpCas9 complex in vitro
    Язык оригиналарусский
    Страницы (с-по)512-518
    Число страниц7
    ЖурналВавиловский журнал генетики и селекции
    Том24
    Номер выпуска5
    DOI
    СостояниеОпубликовано - 2020

    Ключевые слова

    • CRISPR/Cas9
    • Heteroplasmy
    • Mitochondrial DNA
    • The mitochondrial import determinants

    Предметные области OECD FOS+WOS

    • 3 МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ И ЗДРАВООХРАНЕНИЕ
    • 1.06 БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
    • 4 СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ НАУКИ

    ГРНТИ

    • 34 БИОЛОГИЯ

    Fingerprint

    Подробные сведения о темах исследования «Изучение влияния детерминант митохондриального импорта в структуре нРНК на активность комплекса нРНК/SpCas9 in vitro». Вместе они формируют уникальный семантический отпечаток (fingerprint).

    Цитировать